No entanto, quando os espectros de emissão se sobrepõem, a fluorescência de mais de um fluorocromo pode ser detectada. Para corrigir essa sobreposição espectral, é usado um processo de compensação de fluorescência. Isso garante que a fluorescência detectada em um detector específico deriva do fluorocromo que está sendo medido.
Por que precisamos de compensação na citometria de fluxo?
É necessária compensação para um experimento de citometria de fluxo por causa da física da fluorescência. Um fluorocromo é excitado e emite um fóton em uma faixa de comprimentos de onda. Alguns desses fótons se espalham em um segundo detector, fazendo com que as amostras coradas pareçam duplamente positivas.
Qual é o objetivo principal de usar uma célula de compensação?
O objetivo principal é permitir a medição da fluorescência verdadeira no canal primário contaminado pelo transbordamento de fluoróforos vizinhos. Portanto, a compensação corrige a “transgressão” de fluorescência entre os fluoróforos. No entanto, não é perfeito e não pode corrigir todos os efeitos indesejáveis.
O que é matriz de remuneração?
Uma matriz de compensação é calculada usando arquivos de controle fluorescente de cor única que são coletados no ImageStream ou FlowSight com todos os canais coletados e na ausência de iluminação de campo claro ou SSC.
O que é compensação espectral?
Usando espectralcompensação significa que sinal de detectores não primários ainda são usados para aprimorar o sinal verdadeiro dos marcadores sempre que possível. As amostras de controle primário são usadas para nomeação de parâmetros. … As amostras usadas para detectores primários também ajudam a nomear esses parâmetros após a compensação espectral.
