Quanto maior o peso molecular, mais longa a bobina e mais lenta a molécula vai. Então, eletroforese + SDS separa com base no peso molecular, não com base na carga nativa. Nota importante: Proteínas do mesmo comprimento geralmente não podem ser separadas por eletroforese em gel + SDS.
Como separar proteínas de mesmo peso molecular?
Centrifugação, eletroforese e cromatografia são as técnicas mais comuns para purificação e análise de proteínas. A centrifugação separa as proteínas com base em sua taxa de sedimentação, que é influenciada por sua massa e forma.
Quais técnicas separam as proteínas com base na carga?
Proteínas podem ser separadas com base em sua carga líquida por cromatografia de troca iônica. Se uma proteína tiver uma carga líquida positiva em pH 7, ela normalmente se ligará a uma coluna de esferas contendo grupos carboxilato, enquanto uma proteína com carga negativa não (Figura 4.4).
Qual das seguintes técnicas é mais adequada para separar proteínas com base no peso molecular?
Os métodos de cromatografia baseados em partição são muito eficazes na separação e identificação de pequenas moléculas como aminoácidos, carboidratos e ácidos graxos. No entanto, cromatografias de afinidade (ou seja, cromatografia de troca iônica) são mais eficazes na separação de macromoléculas como ácidos nucleicos e proteínas.
Qual tipo de colunacromatografia separa proteínas com base no peso molecular?
A cromatografia de filtração em gel (GF) separa as proteínas apenas com base no tamanho molecular. A separação é conseguida usando uma matriz porosa à qual as moléculas, por razões estéricas, têm diferentes graus de acesso - ou seja, moléculas menores têm maior acesso e moléculas maiores são excluídas da matriz.