Incubar o recipiente em temperatura ambiente por 2-3 minutos . As células firmemente aderentes podem ser removidas rapidamente a 37 °C. Observe as células ao microscópio. As células destacadas aparecem arredondadas e refratárias ao microscópio.
O que acontece se você tripsinizar células por muito tempo?
Incubar células com uma concentração muito alta de tripsina por um período de tempo muito longo danifica as membranas celulares e mata as células. Se não tiver certeza sobre a concentração de tripsina a usar, use uma concentração baixa.
Como você tripsiniza células?
As células podem ser ressuspensas suavemente pipetando a suspensão celular para quebrar os aglomerados. Diluição adicional pode ser feita, se necessário, para contagem de células e/ou subcultura.
Quanto tempo leva para as células se anexarem?
as primeiras células já são anexadas após 3-5 min! Na minha experiência, a maioria dos ECs foi anexada após 10 a 20 minutos. Mas quanto mais você esperar, mais firme será o apego.
É ruim Tripsinizar células dois dias seguidos?
Sim, é prejudicial se você estiver tripsinizando suas células continuamente após 24 horas de divisão. É aconselhável fazer a divisão após 48 horas de divisão. … Você pode manter as células até que a morfologia seja boa (depende do seu tipo de célula, algumas células podem ir até 80 passagens e outras até 10).
