Os dados de densitometria gerados para Western blots são comumente usados para comparar a abundância de proteínas entre amostras. … Dados de densitometria não linear foram observados quando Western blots foram detectados usando fluorescência infravermelha ou quimioluminescência e sob diferentes condições de SDS-PAGE.
O que é análise densitometria?
Densitometria é a medida quantitativa da densidade óptica em materiais sensíveis à luz, como papel fotográfico ou filme fotográfico, devido à exposição à luz.
Como você usa a densitometria na Imagem J?
Densitometria usando ImageJ
- Clique no centro do quadrado e arraste-o para a próxima pista. …
- Para a última pista, repita o procedimento, mas pressione Ctrl e 3 para definir a última pista. …
- Use a ferramenta de linha para desenhar as linhas para eliminar o fundo da pista dos cálculos. …
- Vá para: Analyse→Gels→Label Peaks para obter o relatório.
Como você analisa os resultados do western blot?
Valide suas ferramentas de quantificação . Por exemplo, execute um blot onde as pistas estão carregadas com 20 µg, 15 µg e 10 µg de proteína total. Após a análise, a quantificação relativa das bandas de destino deve ser 2, 1,5 e 1. Experimente diferentes ferramentas e configurações de quantificação até que você possa reproduzir de forma confiável os resultados corretos.
Como você quantifica um western blot?
Passo 1: Determinar o fundo subtraídodensidades de sua proteína de interesse (PI) e o controle de normalização (NC). Passo 2: Identifique o NC que tem o maior valor de densidade. Passo 3: Divida todos os valores NC pelo valor de densidade NC mais alto para obter um valor NC relativo.
