Os anticorpos de controle de carregamento são controles importantes, pois indicam o carregamento igual de amostras em todos os poços. Os controles de carregamento também indicam a transferência adequada de proteínas para a membrana durante o processo de Western blotting. Os controles de carregamento são normalmente proteínas com expressão alta e onipresente.
O que faz um controle de carregamento?
Um controle de carga é uma proteína usada como controle em um experimento de Western blotting. … Eles são usados para garantir que a proteína foi carregada igualmente em todos os poços.
Por que usamos um controle de carregamento no Western blot?
Os controles de carregamento têm um segundo papel como controle em western blots. Eles podem ser usados para verificar se houve transferência uniforme do gel para a membrana em todo o gel. Isso é imperativo quando são feitas comparações dos níveis de expressão de proteínas entre as amostras.
Como você usa o controle de carregamento no Western blot?
Os sinais dos controles de carregamento são normalmente usados para normalizar os sinais das proteínas de interesse. Para usar um controle de carga para esses fins, a detecção com o anticorpo da proteína de controle e o anticorpo experimental deve ser feita no mesmo blot. Uma variedade de proteínas diferentes são usadas como controles de carregamento.
Por que a actina é usada como controle de carregamento?
Beta-actin, geralmente é usado como um controle de carregamento para Western Blot paranormalize os níveis de proteína detectados confirmando que a carga de proteína é a mesma em todo o gel.
