Use fluoróforos que emitem em um comprimento de onda mais distante dos compostos de autofluorescência em sua amostra. Normalmente, fluoróforos de comprimento de onda vermelho distante, como CoralLite 647, são os melhores para isso. Reagentes comercialmente disponíveis, como TrueVIEW (VectorLabs), demonstraram reduzir a autofluorescência de várias causas.
O que causa a autofluorescência?
Autofluorescência é a emissão de luz fluorescente das estruturas oculares na ausência de fluoresceína de sódio. As condições que causam autofluorescência são drusas da cabeça do nervo óptico e hamartoma astrocítico. A pseudofluorescência ocorre quando o excitador azul e os filtros de barreira verde se sobrepõem.
Como você reduz a fluorescência de fundo?
O que você pode fazer para diminuir a fluorescência de fundo
- Tente rotular com um corante que corresponda a um filtro diferente. …
- Meça a intensidade de fluorescência de um poço que contém apenas suas células e o medicamento ou tratamento. …
- Verifique sua mídia. …
- Verifique sua embarcação.
Como você extingue a autofluorescência do sangue?
Um dos métodos mais utilizados para extinguir a autofluorescência é tratamento de tecido com corante Sudan Black B. Sudan Black B é um corante lipossolúvel que se liga aos grânulos de lipofuscina para reduzir sua fluorescência.
O que é autofluorescência em microscopia?
Autofluorescência é a emissão natural de luz porestruturas como mitocôndrias e lisossomos quando absorvem luz, e é usado para distinguir a luz proveniente de marcadores fluorescentes adicionados artificialmente (fluoróforos).
