Como os DdNTPs têm uma molécula de hidrogênio (-H) em vez de um grupo hidroxila (-OH) ligado ao 3'-C de sua desoxirribose, ele não pode se ligar a nenhum nucleotídeo de entrada. Portanto, adição de DdNTPs durante a replicação do DNA pode ser usada para encerrar a reação de síntese.
Por que a síntese de DNA para quando um ddNTP é incorporado na fita de DNA em crescimento?
Se o nucleotídeo adicionado for um "didesoxinucleotídeo" (Figura 6.29), a extremidade 3' da fita crescente terá agora um H, em vez de um OH. Isso impedirá a adição de nucleotídeos adicionais; ou seja, a síntese de DNA in vitro irá parar neste ponto.
Como um ddNTP termina a síntese de DNA?
Quando um ddNTP é incorporado a uma cadeia de nucleotídeos, a síntese termina. Isso ocorre porque a molécula de ddNTP não possui um grupo hidroxila 3', que é necessário para formar uma ligação com o próximo nucleotídeo na cadeia.
Por que os DdNTPs encerram o processo de replicação?
Métodos de Laboratório em Enzimologia: DNA
Didesoxinucleotídeo trifosfatos são prontamente incorporados em uma cadeia de DNA em crescimento, mas não possuem o grupo hidroxila 3' necessário para permitir que a cadeia continue, e efetivamente encerrar a polimerização.
Por que os didesoxinucleotídeos fazem com que a replicação do DNA pare?
Esses ddNTPs não possuem um grupo 3'-OH que é necessário para a formação de uma ligação fosfodiéster entre doisnucleotídeos, fazendo com que a extensão da fita de DNA pare quando um ddNTP é adicionado.