Tripsinização é o processo de dissociação celular usando tripsina, uma enzima proteolítica que quebra proteínas, para dissociar as células aderentes do vaso em que estão sendo cultivadas. Quando adicionada a uma cultura de células, a tripsina quebra as proteínas que permitem que as células adiram ao vaso.
Por que tripsinizamos as células?
A tripsinização é frequentemente feita para permitir a passagem das células para um novo recipiente, observação para experimentação ou redução do grau de confluência no frasco pela remoção de uma porcentagem de as células.
Como a tripsina funciona para separar as células?
Tripsina/EDTA é um método combinado para separar células. Tripsina corta as proteínas de adesão nas interações célula-célula e célula-matriz cortando o aminoácido das proteínas de adesão especificamente na lisina ou aginina no C-terminal se o aminoácido a montante não for prolina.
Como você consegue células aderentes tripsinizadas?
Procedimento
- Retire o meio do recipiente de cultura por aspiração e lave a monocamada com uma solução salina livre de Ca2+ e Mg 2+ para remover todos os vestígios de soro. …
- Dispense tripsina ou solução de tripsina/EDTA suficiente no(s) recipiente(s) de cultura para cobrir completamente a monocamada de células e coloque na incubadora a 37°C por ~2 minutos.
Como desativo a tripsina na cultura de células?
Assim que as células aparecerem separadas, adicione 2 volumesde meio de crescimento completo pré-aquecido para inativar tripsina. Dispersar suavemente o meio pipetando sobre a superfície da camada celular várias vezes para garantir a recuperação de >95% das células. Para culturas sem soro, inibidor de tripsina de soja (Produto nº
