Como sonication pode potencialmente degradar proteínas e desnaturar epítopos de proteínas, a seguir avaliamos o impacto da sonicação na integridade das proteínas.
A sonicação pode danificar proteínas?
Respostas populares (1)
Protocolo de sonicação padrão não pode causar fragmentação de proteínas- a energia é muito baixa. Nem deveria causar sua desnaturação. Ele pode ser desnaturado quando você o sonica por muito tempo e superaquece a amostra. Se você usar cromatografia de níquel, outras bandas podem ser simplesmente impurezas.
A sonicação pode quebrar ligações peptídicas?
A sonicação normalmente não pode quebrar a estrutura primária de umaporque essa estrutura (a sequência de aminoácidos) é construída de ligações covalentes que são muitas vezes mais fortes do que as ligações de hidrogênio e a sonicação pode fornecer a energia necessária para quebrar essas ligações.
A sonicação quebra a membrana nuclear?
A sonicação curta com baixa energia pode romper a membrana plasmática sem quebrar muitas membranas mitocondriais ou nucleares, produzindo mitocôndrias intactas.
A sonicação é necessária para a extração de proteínas?
A solubilização de detergente (por exemplo, SDS) que é necessária para o isolamento de proteínas de membrana resulta em uma cola como lisado principalmente por causa de ácidos nucleicos. Portanto, a sonicação é necessária em tais casos para romper esses ácidos nucleicos. Sonicação gera muito calor e não é bom paramuitas proteínas.