O produto da digestão de restrição pode ser facilmente armazenado a -20 C. A 4 C seria bom, mas para garantir que não haja atividade e nenhuma atividade estrela é recomendado mantê-lo em -20 C.
Como você armazena o DNA digerido?
Tente guardar a fatia de gel na geladeira durante a noite, ou até mesmo derreter a fatia em tampão e congelá-la a -20°C ou -80°C. A degradação do DNA ocorrerá na mesma taxa e nas mesmas condições que o DNA solúvel, portanto, use uma temperatura mais fria para armazenamento mais longo.
O que significa para um plasmídeo ser digerido?
DNA de plasmídeo purificado é digerido com 1 ou mais enzimas de restrição (REs) selecionadas para fornecer um padrão de banda de DNA distinto que é facilmente resolvido por eletroforese. … Enzimas de restrição que cortam dentro do sítio de clonagem múltipla (MCS) e resultam em um padrão de diagnóstico de 2-5 bandas fáceis de resolver são normalmente selecionadas.
Como você armazena plasmídeos linearizados?
Se você está preocupado com os efeitos a jusante do TE, armazene o DNA em uma concentração mais alta e dilua quando necessário, ou use "baixo TE" que é 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. quando o DNA ou RNA está limpo, pode ser armazenado a -20°C por muitos meses sem qualquer degradação.
Por quanto tempo você pode manter o resumo de restrição?
Pro-Tip Dependendo da aplicação e da quantidade de DNA na reação, o tempo de incubação pode variar de 45 minutos a uma noite. Para resumos de diagnóstico, 1-2 horas é geralmente suficiente. Para digests com >1 µg de DNA usado para clonagem, é recomendável digerir por pelo menos 4 horas.
